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正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選清熱利咽膠囊提取工藝研究

時(shí)間:2024-07-06 16:36:12 醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文 我要投稿
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正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選清熱利咽膠囊提取工藝研究

畢業(yè)論文

【摘要】  目的 考察清熱利咽膠囊水煎煮工藝條件。方法 以加水量、煎煮時(shí)間和煎煮次數(shù)3個(gè)因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),以沒(méi)食子酸含量和浸膏收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)綜合評(píng)分,確定清熱利咽膠囊的最佳提取工藝條件。結(jié)果 清熱利咽膠囊的最佳提取工藝為:加10倍量水,煎煮3次,每次1.0小時(shí)。結(jié)論 清熱利咽膠囊提取工藝合理、可行。

【關(guān)鍵詞】  清熱利咽膠囊 ; 正交實(shí)驗(yàn) ; 提; 沒(méi)食子酸; HPLC

Study on Preparation Procedure for Qingre Liyan Capsule with Orthogonal Experiment

    YU Ling?ying1 ,ZHANG Dan2  ,HU Hui?ling1,LIAN Xiao?xiao1

    (1.Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 610072,China;2.Department of Pharmacy, Luzhou Medical College,Sichuan Luzhou 646000,China) 畢業(yè)論文網(wǎng) 論文網(wǎng)

    【Abstract】  Objective To investigate the preparation conditions for Qingre Liyan capsule.Methods The orthogonal experiment was carried on with 3 factors,water quantity,the preparation time and the decoction frequeney,and composite grading were measured by the gallic acid content and extraction rate to determine best preparation conditions for Qingre Liyan capsule.Result The best preparation conditions of Qingre Liyan capsule is: 10 times of water quantity,3 times for decoction,1 hours for each time.Conclusion The preparation conditions of Qingre Liyan capsule is reasonable and feasible.

    【Key words】  Qingre Liyan capsule;   orthogonal experiment;   preparation;   gallic acid;   HPLC

   清熱利咽膠囊為臨床經(jīng)驗(yàn)方,由余甘子、桔梗、麥冬等藥物組成,具有清熱瀉火、生津利咽作用,主要用于口干咽燥,咽喉干癢疼痛等癥狀。根據(jù)處方中藥物性質(zhì),結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際,采用水煎煮法進(jìn)行提取。擬采用正交實(shí)驗(yàn)方法,以沒(méi)食子酸含量和浸膏收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分,優(yōu)選清熱利咽膠囊提取工藝。現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

    1  實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器

    材料與試劑  藥材購(gòu)于成都市荷花池中藥材市場(chǎng),經(jīng)檢測(cè)符合《中國(guó)藥典》2005年版一部有關(guān)的規(guī)定。沒(méi)食子酸(批號(hào)110831?200302,供含量測(cè)定),中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。乙腈為色譜純,水為重蒸餾水,其余試劑均為分析純。

    儀器島津LC?10A高效液相色譜儀; 賽多利斯BP211D電子天平。

    2  實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

    2.1  實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

    根據(jù)處方中藥物主要有效成分的性質(zhì),選擇采用水煎煮提取,并對(duì)提取有較大影響的加水量、煎煮時(shí)間、 煎煮次數(shù)三個(gè)因素進(jìn)行考察,每個(gè)因素選擇3個(gè)水平,用 (L9(34) )正交表安排實(shí)驗(yàn)。因素水平見(jiàn)表1.由于余甘子是君藥,沒(méi)食子酸是其中的主要有效成分之一,因此選擇沒(méi)食子酸為主要評(píng)價(jià)指標(biāo),浸膏收率作為輔助評(píng)價(jià)指標(biāo),采用綜合評(píng)分方法對(duì)提取條件進(jìn)行評(píng)價(jià)。

    2.2  實(shí)驗(yàn)方法

    稱(chēng)取飲片9份,按正交設(shè)計(jì)方案,進(jìn)行煎煮提取,濃縮定容至500 ml,備用。表1  實(shí)驗(yàn)因素水平表

    2.2.1  浸膏收率的測(cè)定[1]  分別精密量取水煎液50 ml 于已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,水浴濃縮至干,置烘箱中105℃干燥3 h,取出,置干燥器中冷卻30 min,精密稱(chēng)重,計(jì)算浸膏收率。

    2.2.2  沒(méi)食子酸含量測(cè)定[2]  ①色譜條件:用18烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑; 乙腈?0.1%磷酸(7∶93)為流動(dòng)相; 檢測(cè)波長(zhǎng)為273 nm; 柱溫40℃; 流速1 ml/min; 理論塔板數(shù)按沒(méi)食子酸峰計(jì)算不低于2 500.②對(duì)照品溶液的制備:取沒(méi)食子酸對(duì)照品,精密稱(chēng)定,加甲醇制成0.04 mg/ml的溶液作為對(duì)照品溶液。③供試溶液的制備:分別取正交實(shí)驗(yàn)的藥液5 ml于25 ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,振搖均勻,再精密吸取1 ml于10 ml量瓶中,甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液作為供試品溶液。④缺余甘子陰性樣品的制備:稱(chēng)取缺余甘子的處方量藥材,同上述方法制成余甘子陰性供試溶液。⑤標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:取對(duì)照品溶液,分別精密吸取1、2、4、6、8、10 ml至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,分別進(jìn)樣10 μl,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),進(jìn)行回歸,得線性方程Y=2 011 966.99X+9 713.16,r=0.999 9,結(jié)果表明,進(jìn)樣量在0.040~0.400 μg之間呈良好的線性關(guān)系。⑥測(cè)定:分別精密吸取正交實(shí)驗(yàn)樣品溶液及對(duì)照品溶液各10 μl,注入液相色譜儀,測(cè)定沒(méi)食子酸峰面積,計(jì)算含量。

    2.3  實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 畢業(yè)論文網(wǎng) 論文網(wǎng)

    以食子酸的含量與浸膏收率為評(píng)價(jià)指標(biāo),沒(méi)食子酸的含量代表提取物中有效成分的含量,應(yīng)作為工藝評(píng)價(jià)的主要指標(biāo),權(quán)重系數(shù)為0.8; 浸膏收率高低也在一定程度反映提取的效果,特別是大生產(chǎn)中具有意義,故權(quán)重系數(shù)為0.2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與數(shù)據(jù)分析(見(jiàn)表2、3)。

    方差分析結(jié)果表明,各因素對(duì)提取的影響順序?yàn)椋篊>A>B,表明因素C和A影響較大,即加水量和煎煮次數(shù)對(duì)提取效果有顯著影響,最佳工藝為A3B3C3.由于煎煮時(shí)間對(duì)提取無(wú)顯著影響,結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際,提取工藝條件調(diào)整為A3B2C3:即加10倍量水,煎煮3次,每次1.0小時(shí)。表2  正交實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3  正交實(shí)驗(yàn)方差分析

    2.4  驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

    根據(jù)篩選的工藝條件,做3份平行實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果浸膏收率為28.59 %、29.86 %、27.93 %; 沒(méi)食子酸的含量為:30.24 mg/g、31.02 mg/g、29.93 mg/g.實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,所篩選的工藝合理、穩(wěn)定,可行。

    3  小結(jié)與討論

    3.1  采用多指標(biāo)綜合評(píng)分方法,確定清熱利咽膠囊的提取工藝為:加10倍量水,煎煮3次,每次1.0小時(shí),提取工藝科學(xué)、穩(wěn)定、可行,具有生產(chǎn)可行性。

    3.2  在本復(fù)方制劑中對(duì)沒(méi)食子酸的含量測(cè)定,曾采用甲醇?水?磷酸的不同比例作為流動(dòng)相進(jìn)行考察,但基線不穩(wěn)定,樣品分離度差。經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn),最后確定正文中所用的流動(dòng)相,能很好地分離沒(méi)食子酸,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可行。

【參考文獻(xiàn)】
  [1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄×.

[2] 孫桂梅,吳宏巖,王會(huì)平,等.高效液相色譜法測(cè)定克銀丸中沒(méi)食子酸含量[J].中國(guó)藥業(yè),2006,15(13):42.

正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選清熱利咽膠囊提取工藝研究

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