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中藥材半顯微性狀鑒定法

時(shí)間:2024-09-13 07:42:05 藥學(xué)畢業(yè)論文 我要投稿
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中藥材半顯微性狀鑒定法

  【摘 要】:目的:尋找出一種適合基層使用的簡(jiǎn)單方便的鑒別材的方法。方法:通過不同儀器下觀察藥物的實(shí)驗(yàn),以對(duì)藥材的分辨率,觀察的清晰度為指標(biāo),以不同的儀器底色的不同光線的強(qiáng)度差別為主要考察因素,探索半顯微性狀鑒別最佳方法及條件。結(jié)果:體視顯微鏡觀察最清楚,掃描儀也能比較清楚地觀察,放大鏡觀察的結(jié)果就不太理想,且底色與藥材的對(duì)比度不同對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也有影響。結(jié)論:此種方法簡(jiǎn)便易行,對(duì)操作人員的專業(yè)知識(shí)要求不高,是一種很好的適用于基層的藥材鑒別方法。

  【關(guān)鍵詞】:半顯微性狀鑒定 放大鏡 掃描儀 體視顯微鏡

  傳統(tǒng)作為中國寶貴資源,在治病及養(yǎng)生方面有著極其重要的作用,由于藥物療效與藥材的質(zhì)量關(guān)系密切,因此對(duì)藥材進(jìn)行鑒別而保證藥物療效就非常重要,F(xiàn)已被廣泛應(yīng)用的藥材鑒定方法有顯微鑒定,性狀鑒定等。顯微鑒定是利用顯微技術(shù)對(duì)中藥的細(xì)胞組織構(gòu)造特征進(jìn)行顯微觀察與分析,以確定其品種和質(zhì)量的一種鑒定方法;性狀鑒定是一種傳統(tǒng)的鑒別方法,是通過眼觀手摸鼻聞口嘗水試火試等十分簡(jiǎn)便的鑒定方法,來鑒別藥材的外觀性狀。本文則建立了一種介于性狀和顯微鑒別方法之間的另一類鑒別方法,它是借助放大鏡掃描儀體式顯微鏡等儀器觀察中藥材細(xì)微的外觀性狀,可稱它為半顯微性狀鑒定。“半顯微“是指它對(duì)中藥表面特征的放大是界于肉眼和生物顯微鏡之間,例如它可以把一個(gè)蘇子放大到一個(gè)乒乓球大小,非常清楚地顯示其表面的紋理,但它還不能看清楚植物細(xì)胞的形態(tài),所以它還是屬于“性狀鑒別”范疇。但由于它是借助儀器對(duì)藥材表面的肉眼看不清的特征進(jìn)行觀察,這也與傳統(tǒng)的性狀鑒定有較大的區(qū)別。半顯微性狀鑒別法主要用于細(xì)小的果實(shí)種子類扁平的中藥飲片葉類及花類藥材的觀察。對(duì)于形體大而厚的藥材的整體觀察則不適用,但亦可用于觀察其表面細(xì)微處的特征。按照這種方法所用到的儀器不同,可分為放大鏡半顯微形狀鑒定,掃描儀半顯微形狀鑒定,體視顯微鏡半顯微性狀鑒定。

  1 放大鏡半顯微性狀鑒定

  放大鏡法就是利用一般的放大鏡來觀察藥材,此種方法簡(jiǎn)便易行,放大鏡又方便攜帶,所以是鑒別藥材形狀的一種經(jīng)常使用的基本方法。但缺點(diǎn)是放大鏡的分辨率不是很高,對(duì)于一些藥材的更為細(xì)微的特征,放大鏡的效果就不是很理想。而且利用放大鏡所得的觀察結(jié)果很難記錄下來,除非親自觀察,否則很難從觀察者的描述中得到很深的印象。

  2 掃描儀半顯微性狀鑒定

  掃描儀法是利用電腦掃描儀來鑒別藥材的方法,掃描儀已是常用的辦公用具。它除了有文件掃描功能,還有兩個(gè)強(qiáng)大的功能——實(shí)物掃描功能和圖像放大功能,后兩個(gè)功能可被利用對(duì)中藥材進(jìn)行半顯微性狀鑒別。具體方法如下:

  2。鑒別用儀器 一臺(tái)中等以上配置的電腦,像素為1200~2400的掃描儀。

  2。軟件 在電腦中加裝Photoshop6。0以上的圖像處理軟件。

  2。2。軟件介紹 Photoshop是一種現(xiàn)被廣泛使用的圖形處理和瀏覽軟件,其功能之齊全是一般的其它圖形處理軟件所不能比的。包括了所有圖形的基本處理,對(duì)圖形進(jìn)行加工。能支持?jǐn)?shù)碼相機(jī)掃描儀體視顯微鏡直接捕獲圖象。我們就是利用它的這種功能將它應(yīng)用于掃描儀半顯微性狀。具體功能使用方法將在下面進(jìn)行詳細(xì)介紹。

  2。3 掃描過程

  2。3。打開軟件 打開Photoshop,點(diǎn)左上角的[文件]下拉出菜單,指向[導(dǎo)入],就可以看到你的掃描儀的型號(hào)了,雙擊掃描儀的型號(hào),即可在Photoshop的背景下進(jìn)行掃描。

  2。3。普通掃描 選擇好藥材樣品,將需要放大的部分朝下放,上面蓋上合適顏色的背板(通常情況下,用白紙即可),在掃描儀上進(jìn)行預(yù)掃;再用取景框框住要掃描的藥材,在24bit色彩,像素300~600間(根據(jù)景框的大小選擇)對(duì)藥材進(jìn)行普通掃描,可見藥材的圖像被直接展示在Photoshop中。

  2。3。3 高精掃描 為了得到更加清晰的掃描結(jié)果,能更好地選擇掃描指數(shù)來觀察藥材,選擇要放大的區(qū)域(區(qū)域選擇不能太大,否則會(huì)占用很大的電腦空間),把像素調(diào)至2400,進(jìn)行掃描,可見藥材被放大的圖像也被直接展示在Photoshop中。觀察這一圖像,看看你對(duì)光線的強(qiáng)弱,對(duì)比度的大小等,滿意不滿意,如果你感覺不行,可以調(diào)整后重新掃描。

  2。3。4 圖像的進(jìn)一步放大 關(guān)掉掃描儀,這時(shí)的Photoshop調(diào)整亮度和對(duì)比度,一般都可以得到較好的圖像,可以清楚地看見藥材的細(xì)微特征。就可以看到放得很大的藥材圖像。如果對(duì)圖像不夠滿意,還可以點(diǎn)Photoshop 就可以起用了,用工具欄中的放大鏡對(duì)圖像進(jìn)行放大,你上的[圖像] 下拉出菜單,指向[調(diào)整],在下拉菜單中點(diǎn)[亮度/對(duì)比度],分別調(diào)整亮度和對(duì)比度,一般都可以得到較好的圖象,可以清晰地看見藥材的細(xì)微特征。

  3 體視顯微鏡半顯微性狀鑒定

  體視顯微鏡法與掃描儀法很相似,就是利用體視顯微鏡對(duì)材的表面特征進(jìn)行觀察鑒定。它可以直接觀察,也可以用一臺(tái)體視顯微鏡和電腦相連,通過電腦中的軟件觀察顯微鏡材的表面特征,并可以拍攝下來的一種藥材鑒別方法。這種體視顯微鏡與普通生物顯微鏡不同,它的放大倍數(shù)一般在10—40之間,生物顯微鏡的放大倍數(shù)則多在40倍以上。由于兩者光的來源不同,因而觀察樣品的圖象部位也有所區(qū)別,體視顯微鏡的光源為反射光,適合于觀察物體的表面,可以清楚地看到其表面特征,與物體的厚度無關(guān);普通生物顯微鏡的光源為透射光,適合于觀察薄片樣品內(nèi)部的組織構(gòu)造等,當(dāng)薄片的厚度超過一定范圍之后就不容易看清楚了。體視顯微鏡法與放大鏡相比的優(yōu)點(diǎn)就是比普通放大鏡的分辨率高,能將肉眼無法看到的細(xì)微特征分辨得很清楚。下面將仔細(xì)介紹這種方法的使用儀器和具體操作步驟:

  3。鑒別用儀器 一臺(tái)中等以上配置的電腦,體視顯微鏡一臺(tái),目鏡一個(gè),連接電腦的數(shù)據(jù)線。

  3。軟件 電腦中加裝Ulead photo explorer軟件。

  3。2。軟件介紹 這也是一個(gè)圖形處理和瀏覽軟件,包括了所有圖形的基本處理,對(duì)圖形進(jìn)行加工。也是一個(gè)圖片瀏覽器。支持多達(dá)幾十種圖片格式,可以把同類圖片合并成一個(gè)圖片集,加上背景作成屏幕保護(hù)或壁紙等等,還支持圖形旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換基本圖形處理功能(具有photoshop的一些插件功能),也支持?jǐn)?shù)碼相機(jī)掃描儀體視顯微鏡直接捕獲圖象。這里利用的就是他能支持體視顯微鏡直接捕獲圖象的功能

  3。3 操作步驟

  3。3。打開軟件 將體視顯微鏡通過電子目鏡和數(shù)據(jù)線接到電腦上。再打開Ulead photo explorer軟件,點(diǎn)左上角的[文件]菜單,選擇其子菜單[TWAIN獲取],會(huì)彈出下級(jí)子菜單,選擇[選取來源]項(xiàng),會(huì)出現(xiàn)一個(gè)窗口列舉了可供選擇的來源,點(diǎn)擊USB PC Camera選項(xiàng),就把該軟件調(diào)到了合適的狀態(tài)。再點(diǎn)擊工具欄中的[TWAIN獲取]項(xiàng),視頻窗口就可出現(xiàn)。該窗口有五個(gè)單選按扭,分別為Device Format Preference SnapshotExit。 選擇Device按扭,單擊USB PC Camera項(xiàng),即可進(jìn)入可以拍照狀態(tài)。

  3。3。實(shí)物拍照 將需鑒別藥材放入體視顯微鏡物鏡下進(jìn)行觀察,調(diào)整顯微鏡使得藥材的表面特征能被最清楚地顯示出來。這時(shí)電腦視頻窗口也會(huì)顯示顯微鏡下可觀察的圖象。如覺得圖象還不夠理想,可選擇Preference項(xiàng)進(jìn)行調(diào)整。雙擊Preference按扭會(huì)出現(xiàn)圖象調(diào)整對(duì)話框。該對(duì)話框可分為Image control In/Outdoor Display等若干區(qū)域。Image control區(qū)域較常用,可通過調(diào)節(jié)Brightness(亮度)Contrast(對(duì)比度)hue(色度)等來使得圖象最清楚。In/Outdoor區(qū)僅有Indoor(門內(nèi))和Outdoor(門外)兩個(gè)單選按扭,經(jīng)我們初步實(shí)驗(yàn)摸索可知這兩個(gè)按扭是用于調(diào)節(jié)光線強(qiáng)弱的。Display區(qū)有LCD和 CRT兩個(gè)單選按扭,LCD是Liquid Crystal Display(液晶顯示)的縮寫,CRT是Cathode Ray Tube(使用陰極射線管)的縮寫。一般情況只需調(diào)節(jié)這幾項(xiàng),其它選項(xiàng)隨系統(tǒng)自己而定即可。當(dāng)圖象效果很好時(shí)點(diǎn)擊確定按扭即完成對(duì)圖象的調(diào)整。這時(shí)單擊Snapshot即可以拍攝圖象。

  3。3。3 保存文件 拍攝圖象的同時(shí)軟件本身已將其保存在地址欄顯示的文件夾內(nèi)。,單擊工具欄中[打開查看器]工具就可以查看圖象文件,這時(shí)圖象會(huì)出現(xiàn)在一個(gè)只保存有圖象的查看器窗口里面,通過這個(gè)窗口可再次對(duì)照片進(jìn)行調(diào)整和保存等處理。調(diào)整操作和前面相同,對(duì)圖象另保存的操作如下:?jiǎn)螕舨榭雌鞔翱诠ぞ邫谥械腫另存為]工具,就會(huì)彈出一個(gè)文件另存為對(duì)話框,在這個(gè)對(duì)話框內(nèi)的地址欄鍵入你希望文件保存地址,然后點(diǎn)擊保存,圖象文件就會(huì)復(fù)制一份保存入你選擇的地址。在這個(gè)查看器窗口內(nèi)你還可以對(duì)圖象進(jìn)行剪切懸轉(zhuǎn)放大縮小等一系列的操作。

  3。3。4 再次拍照 當(dāng)你想從查看器窗口返回到視頻窗口時(shí),使用窗口工具欄最左端的返回工具就可以完成。然后在視頻窗口又可以像第一次拍照一樣對(duì)同一藥材進(jìn)行再次拍照或?qū)ζ渌乃幉倪M(jìn)行拍照。后面的調(diào)整保存等操作也相同。

  現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用的鑒定方法可用于絕大多數(shù)藥材的鑒定,且能從不同角度鑒別同一藥材,但這些鑒別方法也有其難以克服的不足。例如性狀鑒別對(duì)包括形狀大小顏色表面特征質(zhì)地折斷面氣味水試火試等方面的鑒別。藥材的大小是指長(zhǎng)短粗細(xì)厚薄。而對(duì)于藥材上的一些細(xì)微特征的觀察,特別是有些很小的種子類藥材,如葶藶子芥子車前子菟絲子等時(shí),肉眼不好區(qū)分其形狀如何,藥材表面是光滑還是粗糙,有無皺紋皮孔或毛茸等。又如雙子葉植物的根類藥材頂部有的帶有根莖;單子葉植物根莖有的具膜質(zhì)鱗葉;蕨類植物的根莖常帶有葉柄殘基和鱗片。但很多藥材的表面特征通過肉眼也是觀察不到的,必須借助于一定的儀器來觀察。顯微鑒定是利用顯微技術(shù)對(duì)中藥進(jìn)行顯微分析,以確定其品種和質(zhì)量的一種鑒定方法。顯微鑒定主要包括組織鑒定和粉末鑒定。組織鑒定是通過觀察藥材的切片鑒別其組織構(gòu)造特征,適合于完整的藥材或粉末特征相似的同屬藥材的鑒別;粉末鑒定是通過觀察藥材的粉末制片鑒別其細(xì)胞分子及內(nèi)含物的特征,適合于破碎粉末狀藥材或中成藥的鑒別。進(jìn)行顯微鑒定,鑒定者必須具有植(動(dòng))物解剖的基本知識(shí),掌握制片的基本技術(shù)。由于鑒定的不同(完整破碎粉末)和藥用種類及藥用部位的不同,選擇顯微鑒定的方法也不同。鑒定時(shí),首先要根據(jù)觀察的對(duì)象和目的,選擇具有代表性的藥材,制備不同的顯微制片,然后依法進(jìn)行鑒別[1]。這些都局限了顯微鑒定這種方法的廣泛性普遍性。

  基于上面兩種方法的優(yōu)點(diǎn)和不足,我們就半顯微性狀鑒別方法進(jìn)行了研究探索。從以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果看來,這種方法利用了低倍的顯微儀器來觀察藥材以求結(jié)果的準(zhǔn)確性及區(qū)分藥物的廣泛性,而不用像一般顯微鑒定那樣對(duì)藥材進(jìn)行復(fù)雜的解剖,并根據(jù)鑒定材料的不同和藥用種類及藥用部位的不同而使用不同的制片方法,選擇不同的顯微鑒定方法,這就使得這種方法保留了一般顯微鑒定的準(zhǔn)確的特點(diǎn)而不用操作那么復(fù)雜。另外它仍是對(duì)鑒別材料的表面特征進(jìn)行鑒別而無法觀察到藥材組織構(gòu)造特征細(xì)胞分子及內(nèi)含物的特征,因此我們?nèi)詫⑦@種方法歸為性狀鑒定的范圍內(nèi),但這是種特殊的性狀鑒定方法,既具有一般性狀鑒定的簡(jiǎn)單易行迅速的特點(diǎn),又比其觀察的更為細(xì)致:而且可以避免一般顯微鑒定操作復(fù)雜的弊端。綜合這種半顯微性狀鑒定法的各方面特征,可知它是種介于性狀鑒定和顯微鑒定中間的方法,有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),是對(duì)現(xiàn)有的四大鑒別方法的重要補(bǔ)充。

  參考文獻(xiàn)

  [1]康廷國主編。中藥鑒定學(xué)[M]。北京:中國藥出版社,2003:34—39

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